一例38岁的男性患者，因车祸伤后植物生存状态23个月来院，在外院曾因双侧额颞顶叶挫裂伤、脑内血肿急诊行双侧开颅血肿清除、去骨瓣减压术，伤后一直昏迷。
病例摘要及诊疗分析
现病史
患者男，38岁，因“车祸伤后持续昏迷23个月”入院。
23个月前因车祸中头部受撞击致深昏迷，在外院急诊行头颅CT示双侧额颞顶叶挫裂伤、脑内血肿，急诊行双侧开颅血肿清除、去骨瓣减压术，伤后11个月以来一直处于植物生存状态。
查体：Glasgow评分6分，植物生存状态，气管切开，双侧瞳孔直径3 mm，对光反射迟钝，颈项强直，四肢肌张力明显增高伴阵发性抽搐，双侧病理征阳性，原始反射阳性，尿失禁。头颅CT示：双侧额叶及枕叶、右侧顶叶及颞叶、脑干多处大片状软化灶。
分析：患者处于一种特殊的意识障碍，与长期昏迷、低反应状态及脑死亡不同，符合植物状态诊断标准，他认知功能完全丧失，丘脑下部及脑干功能基本保存。
既往史
既往体健，否认高血压、冠心病、糖尿病病史。
诊疗经过
经过1年的神经营养、间断应用安宫牛黄丸、高压氧、针灸、按摩等综合促醒治疗，仍处于植物生存状态，应用肌松剂之后四肢肌张力增高仍未缓解。PET- CT示：双侧颞叶、枕叶、右侧顶叶、颞叶多发脑软化灶葡萄糖代谢缺损。神经电生理检查结果：移植前脑电图为高度异常脑电图（限局性左侧前额、额、前、中颞导病理波及左侧前头部导慢波灶）。移植前体感诱发电位检查：双正中神经N20波及双胫神经P40波均消失。
分析：经过长时间观察可以判定患者为持续性植物状态（Persistent Vegetative State，PVS），目前常用的促醒方法改善其意识障碍的可能性很小。近年来干细胞移植逐渐成为神经科学研究的热门，并逐渐为临床所采用，成为脑损伤患者治疗的希望。骨髓间充质干细胞具有高度增殖并分化为神经细胞的能力，作者采用患者自体骨髓间充质干细胞进行移植，从而达到提供神经元并促进内源神经干细胞分化的目的，以观察干细胞对颅脑损伤后PVS患者的治疗作用。
细胞获取及鉴定方法
获取骨髓间充质干细胞：穿刺患者髂后上棘取骨髓5 min，无菌条件下用0.5 ml肝素抗凝，立即转移至1：1000级层流无菌实验室，等量的L-DMEM培养基稀释，在10 ml离心管内加入Percoll细胞分离液(1.073g／ml)5 ml，加入5 ml骨髓液。2500转／分离心20分钟，吸取分界面的白色絮状细胞层，用磷酸缓冲液（PBS）混匀，1000转／分离心5分钟，同法再洗涤1次，加入盛有5 mlDMEM／F12培养基的塑料培养瓶，置入37。C、5％的CO2孵箱培养。
1周后细胞在DMEM/F12+15%胎牛血清的培养基中贴壁生长，见图1。对所获得的细胞进行表面标志的组化染色表明，培养的细胞具有骨髓干细胞独特的表型特征，即CD105阳性和CD34阴性，见图2。
图1 CD105表面抗原
图2 CD34表面抗原
